24/09/2026
في الجزء الأول بدأنا الـMolecular Cloning Workflow من الـDNA Extraction لحد Ligation.
طيب بعد ما عملنا الـLigation وكونّا الـRecombinant Plasmid… إيه اللي بيحصل بعد كده؟ 👇
Bacterial Transformation
في الخطوة دي بندخلالـRecombinant Plasmid لل Competent Bacterial Cells، بحيث تقدر البكتيريا تحمل الـplasmid وتتكاثر بيه علشان نزود عدد الDNA اللي احنا عايزينه.
Mechanisms of transformation: https://www.youtube.com/watch?si=CCIl-qneJrlTvber...
Heat Shock transformation : https://www.youtube.com/watch?si=5LGLzFtAA9AUpP7R...
Electroporation Method : https://www.youtube.com/watch?si=es3FUFkxqqaZxvAq...
Bacterial Transformation protocol : https://www.youtube.com/watch?si=i9KZdZeNItrAmjF1...
Selection & Colony Screening
بعد الـTransformation، مش كل الخلايا هتكون عندها الـplasmid اللي احنا عايزينه.
فهنا بنعمل Selection للحصول على الخلايا اللي تحتوي علي الـplasmid، وبعدها Screening علشان نحدد الـcolonies اللي يُحتمل إنها تحتوي على الـcorrect construct.
Blue White Screening : https://www.youtube.com/watch?si=vW0A8SmJpy-g77b9...
Blue White Screening protocol : https://www.youtube.com/watch?si=4BReejyxftisqaMF...
Colony PCR
طريقة سريعة علشان نفحص الـbacterial colonies والنتأكد من وجود الـDNA Insert بالحجم المتوقع.
What is Colony PCR : https://www.youtube.com/watch?si=WgY72m4ElF-okPGW...
Colony PCR protocol : http://youtube.com/watch?si=ar1gD0zoZjK3QXtk...
DNA Sequencing
وأخيرًا، بنستخدم DNA Sequencing للتأكد من الـDNA sequence نفسه، والتأكد إن الـinsert موجود بالترتيب الصحيح.
What is DNA Sequencing ? : https://www.youtube.com/watch?si=L8vqvx3FsZ6Ufqv1...
DNA Sequencing Platforms : https://www.youtube.com/playlist...
Sequencing Protocol : https://www.youtube.com/watch?v=bJfed2B2Pzk
Sequence Analysis Protocol-1: https://www.youtube.com/watch?v=iqAmkNSu3oI
Sequence Analysis Protocol-2 : https://www.youtube.com/watch?v=7CoIjBvV274
📌 Save the post واستنى الجزء الجاي من سلسلة Biotechnology Lab techniquesولو شايف إن في Technique مهمة لازم تكون في السلسلة، اكتبها في الـcomments 👇
Voir moins
Enhance your genetics instruction with The Jackson Laboratory's Tea...
